畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (12): 2235-2242.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.12.015
滑翔1,胡中凯1,黄小波1,文心田1,曹三杰1*,文翼平1,伍锐1,邓静1,赵松1,尹人杰2,常晓霞1,欧阳达1,张仙1
HUA Xiang1,HU Zhong-kai1,HUANG Xiao-bo1,WEN Xin-tian1,CAO San-jie1* ,WEN Yi-ping1,WU Rui1,DENG Jing1,ZHAO Song1,YIN Ren-jie2,CHANG Xiao-xia1,OUYANG Da1,ZHANG Xian1
摘要:
猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)是三种常见的仔猪病毒性腹泻病原,作者拟构建可同时检测三种病原的cDNA基因芯片。分别根据PEDV基因(S、M)、TGEV基因(S、N)、PoRV基因(VP7、NSP4)的保守区设计引物扩增靶基因,进行PEDV-TGEV-PoRV的cDNA阵列设计,建立了扩增标记探针的多重PCR方法,并对所构建cDNA芯片的特异性、灵敏性、重复性进行了评价。确定了该cDNA芯片的阳性判断标准:SNR大于或等于2.0(或信号强度中位值大于等于1 500)。PEDV-TGEV-PoRV诊断cDNA芯片具有良好的特异性,该芯片不与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病病毒发生交叉反应;芯片的最低检测质量浓度为20 pg•μL-1;同一张芯片可重复使用至少7次。本研究为鉴别三种仔猪病毒性病的鉴别诊断提供了新的高通量检测技术。
中图分类号: